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點(diǎn)擊次數(shù):245 發(fā)布時間:2023/8/28 11:14:45
Matrix IPS驗(yàn)證含酚紅基質(zhì)膠
Matrix IPS驗(yàn)證無酚紅基質(zhì)膠
規(guī)格 : 5 mL
儲存:-20℃
年限:2年
基底膜是動物體內(nèi)上皮細(xì)胞基底面的一層基質(zhì)膜。LYNJUNE®Matrix是從Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)小鼠腫瘤組織提取的基底膜成分,所形成的基質(zhì)膠。該基質(zhì)膠主要成分為laminin,collagen IV,heparan sulfate proteoglycans(Kleinman et al. 1986)。同時,該基質(zhì)膠也包含多種生長因子,例如表皮生長因子EFG,血小板衍生生長因子PDGF,神經(jīng)生長因子NGF,堿性成纖維細(xì)胞生長因子FGF-2,乙型轉(zhuǎn)化生長因子TGF-beta和胰島素樣生長因子ILGF(Vukicevic et al. 1992)。
產(chǎn)品來源:
Engelbreth-Holm-Swarm(EHS) 小鼠腫瘤基底膜成分
產(chǎn)品儲存:
建議您融化后先按照單次用量進(jìn)行分裝,保存-20°C冰箱,有效期2年。
產(chǎn)品性質(zhì):
本品在4°C條件下為液態(tài),但在加熱到37°C時呈凝膠狀態(tài);|(zhì)膠凝固后,重新放回4°C過夜,基質(zhì)膠可再次液化。
注意事項(xiàng):
該基質(zhì)膠在溫度高于10°C時就會開始凝固成膠,所以盡量在冰上操作基質(zhì)膠。類器官傳代時,如果為了避免酶對類器官造成影響,可直接用4°C預(yù)冷的基礎(chǔ)培養(yǎng)基對基質(zhì)膠進(jìn)行緩慢吹打,即可將類器官從基質(zhì)膠中釋放出來。
產(chǎn)品應(yīng)用:
本品適用于以無飼養(yǎng)層方法進(jìn)行人胚胎干細(xì)胞hES、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞ips的擴(kuò)增和維持。
操作方法:
人胚胎干細(xì)胞hES和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞ips無飼養(yǎng)層培養(yǎng)法(操作所需時間為1小時)
1.將基質(zhì)膠于4°C冰箱里的冰浴中過夜解凍,并用預(yù)冷的槍頭,對基質(zhì)膠進(jìn)行緩慢吹打5次,進(jìn)行混勻。注意不要產(chǎn)生氣泡。如產(chǎn)生氣泡,通過掌上離心機(jī)低速短暫離心去除氣泡。
2.將細(xì)胞培養(yǎng)板放置于培養(yǎng)箱預(yù)熱。
3.用預(yù)冷的槍頭將解凍的基質(zhì)膠進(jìn)行分裝。
4. 用4°C預(yù)冷的無血清培養(yǎng)基將基質(zhì)膠原液以1:100的比例進(jìn)行稀釋,然后將基質(zhì)膠稀釋液均勻鋪開并完全覆蓋培養(yǎng)板。推薦修飾培養(yǎng)板所用的基質(zhì)膠稀釋液的量為300µL/cm2。
5.將含有修飾液的培養(yǎng)板在室溫靜置一小時。
6.吸掉修飾液,并在培養(yǎng)板上立即種上干細(xì)胞與培養(yǎng)基(mTeSR1)混合液。注意一定不要讓修飾過的培養(yǎng)板表面變干。
參考文獻(xiàn):
1. Kleinman HK, et al, Basement membrane complexes with biological activity. Biochemistry 25: 312 (1986).
2. Vukicevic, Slobodan, et al. Identification of multiple active growth factors in basement membrane Matrigel suggests caution in interpretation of cellular activity related to extracellular matrix components. Experimental cell research 202: 1 (1992).
3. Guillen, K P, et al. A human breast cancer-derived xenograft and organoid platform for drug discovery and precision oncology. Nature Cancer 3: 232 (2022).
僅 供 研 究 用 途 ,不 得 用 于 診 斷 或 治 療 程 序 。
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更新時間:2024/11/12 8:46:40
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