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點擊次數:159 發(fā)布時間:2021/1/14 15:07:00
人蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA檢測試劑盒本生生物公司供應:elisa試劑盒,血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進口凍存管,細胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。
貨號:BS-1477
規(guī)格:96T/48T
產品名:人蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA試劑盒
檢測種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨、猴ELISA試劑盒等種屬。
保存條件及有效期:
1、試劑盒保存:2-8℃。
2、有效期:6個月
標記物:血清、血漿、組織勻漿等
【測試種屬】犬、大小鼠、人、豚鼠、兔子、牛羊、豬、雞鴨elisa試劑盒等種屬
【儲存方式】:2-8℃
【檢測目的】用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。
【用途】科研實驗用,不用于臨床診斷。
人ELISA試劑盒 人ELISAkit 試劑盒代測 蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)
人蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA檢測試劑盒
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA試劑盒操作步驟:
人蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA試劑盒組成:
試劑盒組成48 孔配置96 孔配置保存
說明書1 份1 份
封板膜2 片(48)2 片(96)
密封袋1 個1 個
酶標包被板1×481×962-8℃保存
標準品:540μg/L0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存
標準品稀釋液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存
酶標試劑3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
樣品稀釋液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
顯色劑 B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
終止液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存
濃縮洗滌液(20ml×20 倍)×1 瓶(20ml×30 倍)×1 瓶2-8℃保存
人蛋白質二硫鍵異構酶(PDI)ELISA檢測試劑盒
ELISA測定的影響做如下討論。
血清是常用的ELISA標本,血漿般可視為與血清同等的標本,標本引起的假陽性和假陰性結果主要是干擾性物質所致,分為內源性物質和外源性物質兩種:
1. 內源性物質 有人認為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質,可以不同程度影響檢測結果。常見的干擾物質有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應物質和其它物質等。
外源性物質
2. 外源性物質常常是由于用于ELISA測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集不全和采血管中添加物等影響。
(1)標本溶血 由于各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標記的ELISA測定中,會導致非特異性顯色,干擾測定結果。為克服上述干擾作用,標本采集時必須注意避免溶血。
(2)標本受細菌污染 因菌體中可能含有內源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本樣,亦可產生非特異性顯色而干擾測定結果。
(3)標本保存不當 在冰箱中保存過久的標本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、甚至造成假陽性;標本放置時間過長(如天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5天內測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。
(4)標本凝集不全 在沒有促凝劑和抗凝劑存在的情況下,正常血液采集后1/2~2h開始凝固,18~24h完全凝固。臨床檢驗工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,此時的血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結果;這類情況于次日復查時因血凝已完全,血清中不再有纖維蛋白原存在,故復查結果變?yōu)殛幮浴楸苊馍鲜龈蓴_作用,解決的辦法是血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清,或標本采集時用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當的促凝劑。
(5)標本管中添加物質的影響 抗凝劑(如肝素,EDTA)、酶抑制劑(如NaN3可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性)及快速分離血清的分離膠等均對ELISA測定有定干擾作用。 綜上所述,對臨床檢驗ELISA測定中出現的假陽性或假陰性結果,在考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應從標本因素方面進行分析,并應采取相應措施排除干擾作用,從而為臨床提供正確可靠的檢測結果。
產品用途:可用于科研實驗,不用于臨床治療!
更新時間:2024/12/11 16:39:42
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