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點(diǎn)擊次數(shù):167 發(fā)布時(shí)間:2023/2/6 10:56:15
胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25 :0.02) 天津本生
產(chǎn)品名稱胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)
REF:CC032
儲(chǔ)運(yùn)條件
-20℃保存。
產(chǎn)品組成
組分規(guī)格 CC032-100ml CC032-500ml
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%) 100ml 500ml
主要成分:主要由 0.25%胰酶、0.02%EDTA 等組成,不含酚紅,過(guò)濾除菌。
自備材料:
1. 微量移液器
2.PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液
3. 顯微鏡
4. 離心機(jī)
胰蛋白酶-EDTA 溶液(0.25%:0.02%) 天津本生 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰臟產(chǎn)生沒(méi)有活性的胰蛋白酶原分泌到小腸后,小腸內(nèi)的腸肽酶會(huì)活化該酶原,形成胰蛋白酶。膚
蛋自酶的特點(diǎn)還在于已經(jīng)活化的胰蛋白酶,能夠繼續(xù)活化更多胰蛋白酶原,這種過(guò)程即自動(dòng)催化。胰蛋白酶在小腸工作,它會(huì)將
蛋自質(zhì)水解為肽,進(jìn)而分解為氨基酸,其適溫度約為37℃。
Regal的Trypsin-EDTA solution:含0.25%胰班、0.02%EDTA。該落液經(jīng)過(guò)過(guò)混除菌,可以直接用于培養(yǎng)細(xì)胞的消化,或者一
些組織的消化。該產(chǎn)品通常室溫消化 Imin 左右就可以消化下大多數(shù)貼壁細(xì)胞。
胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25 :0.02) 天津本生
使用方法(僅供參考)
1.貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌的 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
2加入少量Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min,不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)。此時(shí)吸除胰酶細(xì)胞消化液,加入含血清的細(xì)腳培手清,吹打下細(xì)胸,即可直接用干后續(xù)空驗(yàn)。
、苋绻l(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
5如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心lmin,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2.組織的消化
不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
更新時(shí)間:2024/11/8 8:44:46
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