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ELISA試劑盒酶標板在什么情況下失效,實驗數(shù)據(jù)處理!
ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年,假設(shè)保存妥當?shù)脑,不會出現(xiàn)疑問的。但不要重復(fù)凍融。當然假設(shè)是正常的DAS-ELISA查看試劑盒等,應(yīng)當放在4℃支配冰箱保存。建議ELISA試劑盒凍結(jié)后一次用完。已開封或許運用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,ELISA查看試劑盒開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免濕潤。
但要留意的是,假設(shè)將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來就當即運用的話,也許會影響,其直接的效果是對一些弱陽性標本的查看出現(xiàn)假陰性。
建議:先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20分鐘以上后,再進行測定,以使試劑盒在ELISA查看試劑盒運用與室溫平衡。這么做的目的,要是為了在后面的溫育反應(yīng)進程中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地到達所懇求的高度,以滿足測定懇求。
ELISA試劑盒的板子啥情況下會失效?
1.一般商品化的酶標板懇求密閉4℃保存,長時間顯露或未密閉保存,要么失效,要么效果為非可靠數(shù)據(jù);假設(shè)是自個包的板,也許效期更短,保存條件懇求更高,至于顯色劑,正常條件下一天內(nèi)不會失效的。
2.第三板是不是*按照兩板加全部試劑,假設(shè)缺失其間某一進程,效果也會無色。
ELISA實驗的計算方法:
方法:
1、擬和曲線:
輸入*行:濃度值,如
輸入第二行:該濃度下的調(diào)整后的od值,如00.5861.3971.9973.42
選擇這些輸入的數(shù)據(jù),用插入里的圖表按鈕,進入圖表向?qū)В?ldquo;標準類型"中選擇“xy散點圖";在“子圖表類型"中選擇“折線散點圖",按“下一步";選擇“系列產(chǎn)生在行",按“下一步";數(shù)據(jù)標志,可以填寫:如數(shù)據(jù)y軸,OD值;數(shù)據(jù)x軸,濃度;按下一步,點擊完成?傻们圖。
單擊曲線,按右鍵,選擇“添加趨勢線",在類型中,選擇多項式;在選項中,選擇顯示公式,選擇顯示R平方值。
得到公式和R平方值。
也可以用上面說的方法:雙擊圖表,把它輸入到圖表的數(shù)據(jù)中,就可以擬和曲線。
2、ELISA試劑盒計算濃度:
*次實驗:
標準曲線為:
y=-4E-05x2+0.026x
R2=0.9745
為例,已知OD值,計算濃度。
由于y=-4E-05x2+0.026x,所以可以得到:
4E-05x2-0.026x+y=0
ax2+bx+y=0
a=4E-05;b=-0.026;
x=(-b-(b*b-4ay)(平方根))/(2*a)
代入a,b,和y值,得
x=(0.026-(0.026*0.026-0.00016*y)(平方根))/(2*0.00004)
在excel里可以用以下公式表示:
x=(0.026-EXP(LN(0.026*0.026-0.00016*y)/2))/(2*0.00004)
通用公式為:
x=(-b-EXP(LN(b*b-4ay)/2))/(2*a)
您可以應(yīng)用excel的公式拷貝功能,計算所有濃度。
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