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ELISA試劑盒的操作方法、注意事項和優(yōu)勢
ELISA Kit通稱為ELISA試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附檢測試劑盒,是一種靈敏度高,特異性強,重復(fù)性好的實驗方法,且因其試劑穩(wěn)定,易保存,耗時短,操作簡便,結(jié)果判斷客觀等優(yōu)點,已被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)檢驗的各域中,得到全科研工作者的認(rèn)可。
ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗的標(biāo)準(zhǔn)程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(capture Ab)固定在固相載體上,再加入一檢測抗體(primarydetection Ab),形成一個抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶(enzyme)標(biāo)記了,即可用來直接測定抗原的量,若無,則可利用另一個酶標(biāo)記的二抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)(substrate),作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關(guān)系,依此原理計算出樣本中的抗原總量或濃度。
BUNSEN本生 ELISA Kit覆蓋人、小鼠、大鼠、兔、豬等種屬,指標(biāo)齊全。每個試劑盒均經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)控檢驗,結(jié)果穩(wěn)定,重復(fù)性和線性范圍好,特異性和靈敏度高,涉及免疫學(xué)、神經(jīng)性、微生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、表觀遺傳學(xué)等多個科學(xué)域。
BUNSEN本生產(chǎn)品優(yōu)勢:
1.采用高效、靈敏、特異的抗體。
2.易保存、耗時短、操作簡便、性價比高。
3.穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,線性范圍好。
4.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體。
5.適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種標(biāo)本類型。
Elisa試劑盒操作方法:
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋,請按照說明書進(jìn)行操作。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3.加樣:不規(guī)范的移液操作可能帶來誤差。
1)空白孔,空白對照孔不加樣品,生物素標(biāo)記的抗體,鏈霉親和素-HRP,只加顯色劑A&B和終止液,其余各步操作相同;
2)標(biāo)準(zhǔn)品孔:加入標(biāo)準(zhǔn)品50ul,鏈霉親和素-HRP50ul(標(biāo)準(zhǔn)品中已事先整合好生物素抗體,故不加);
3)待測樣品孔:加入樣本40ul,然后各加入抗NE抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul,蓋上封板膜,輕輕震蕩混勻,37℃溫育60分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.顯色:每孔先加入顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
7.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8.測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后10分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程,再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。
10.僅供參考,以試劑盒內(nèi)實際說明書為準(zhǔn)。
Elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。
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