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　　什么是細(xì)胞凍存?細(xì)胞凍存需要注意哪些事項?

　　細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的重要方法，在生化及臨床研究工作中十分重要。細(xì)胞凍存是指利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于低溫環(huán)境中，使細(xì)胞代謝率降低，暫時脫離生長狀態(tài)，并將其細(xì)胞生物學(xué)特性保存起來，然后在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞的過程。所以，細(xì)胞凍存包括凍存和復(fù)蘇兩個環(huán)節(jié)。下面是天津本生技術(shù)小編的詳解：

　　細(xì)胞凍存可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而導(dǎo)致的細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。所以細(xì)胞凍存的操作十分關(guān)鍵，那么細(xì)胞凍存需要注意哪些事項呢?

　　先為了大限度的保存細(xì)胞活力，細(xì)胞凍存遵循慢凍快融的原則。

　　細(xì)胞凍存的注意事項：

　　1、細(xì)胞凍存一天好換一次培養(yǎng)液，并觀察細(xì)胞生長情形。保證細(xì)胞的生長狀態(tài)良好，無污染，且活細(xì)胞百分比為 90%以上。

　　2、凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑，DMSO應(yīng)為試劑等，濃度為10%。

　　3、細(xì)胞應(yīng)緩慢冷凍，可使用可控制降溫速度的低溫冰箱或者低溫冷凍容器，使溫度每分鐘大約降低 1°C。

　　4、將冷凍的細(xì)胞于–70℃以下溫度儲存，裝有冷凍細(xì)胞的凍存管可浸于液氮或者在液氮上方的氣相空間內(nèi)保存。

　　細(xì)胞復(fù)蘇的注意事項：

　　1、取細(xì)胞時應(yīng)做好防護(hù)措施，帶好防凍手套，護(hù)目鏡。防止細(xì)胞凍存管因氣溫急劇上升發(fā)生炸裂。

　　2、必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化，避免復(fù)蘇溫度太慢，造成細(xì)胞的損傷。如果凍存管管壁較厚，隔熱效果較好，可以適當(dāng)提高水浴溫度(37℃~40℃)。

　　3、提預(yù)定超凈臺，減少復(fù)蘇后插在冰盒里等待的時間。

　　后，細(xì)胞凍存過程中，所有與細(xì)胞接觸的溶液和設(shè)備均應(yīng)為無菌狀態(tài)。必須采用正確的無菌技術(shù)，并且在層流通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。

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