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　　常見血清使用問題

　　1.血清使用時一定需要滅活么?

　　答：實(shí)驗(yàn)顯示，經(jīng)過正確處理的熱滅活血清對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)，或完全沒有任何作用，甚至因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜�清的質(zhì)量，而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清，沉淀物的形成會顯著的增多，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察，像是“小黑點(diǎn)”，常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染，而把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物更增多，使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。若非必須，可以不需要做熱處理這一步。不但節(jié)省時間，更確保血清的質(zhì)量。

　　2.何謂FBS,FCS,CS,HS?

　　答：FBS(fetalbovineserum)和FCS(fetalcalfserum)是相同的意思，兩者都是指胎牛血清，F(xiàn)CS乃錯誤的使用字眼，請不要再使用。CS(calfserum)則是指小牛血清。HS(horseserum)則是指馬血清。

　　3.保存血清的方法是什么?

　　答：我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇�容器�?nèi)，再放回冷凍。

　　4.如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?

　　答：將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

　　5.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理?

　　答：血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白)在血清解凍后，也會存在于血清中，亦是造成沉淀物的原因。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。不使用過濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗�可能會阻塞過濾膜。

　　6.如何避免血清中沉淀物的產(chǎn)生?

　　答:(1)解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，非常容易產(chǎn)生沉淀物。

　　(2)解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

　　(3)請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

　　(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。

　　(5)若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時搖晃均勻。溫度過高，時間過久或搖晃不均勻，都會造成沉淀物的增多。


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