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　　人腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒使用說(shuō)明

　　一、產(chǎn)品概述

　　人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒是一種用于定量檢測(cè)人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中TNF-α含量的體外診斷試劑。本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理，通過(guò)特異性抗體與TNF-α結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再利用酶催化底物顯色的方法，實(shí)現(xiàn)對(duì)TNF-α的定量檢測(cè)。

　　二、試劑盒組成

　　本試劑盒包含以下組件：

　　1. 酶標(biāo)板：包被有特異性TNF-α抗體的96孔板。

　　2. 標(biāo)準(zhǔn)品：已知濃度的TNF-α標(biāo)準(zhǔn)溶液，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　3. 抗體工作液：含有TNF-α特異性抗體的溶液，用于與樣本中的TNF-α結(jié)合。

　　4. 酶結(jié)合物：含有辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的TNF-α抗體的溶液，用于形成免疫復(fù)合物。

　　5. 底物液：含有四甲基聯(lián)苯胺(TMB)的溶液，用于顯色反應(yīng)。

　　6. 終止液：用于終止顯色反應(yīng)的溶液。

　　7. 洗滌液：用于洗滌酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的雜質(zhì)。

　　三、實(shí)驗(yàn)原理

　　ELISA法檢測(cè)TNF-α的基本原理是：將TNF-α特異性抗體包被在酶標(biāo)板上，形成固相抗體;加入樣本后，樣本中的TNF-α與固相抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物;再加入酶結(jié)合物，與免疫復(fù)合物中的TNF-α特異性抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物;加入底物液，酶催化底物顯色，顏色深淺與TNF-α含量成正比。通過(guò)測(cè)定顏色深淺，可以計(jì)算出樣本中TNF-α的含量。

　　四、實(shí)驗(yàn)步驟

　　1. 準(zhǔn)備工作：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘;按照實(shí)驗(yàn)需要，準(zhǔn)備好所需的試劑、樣本和實(shí)驗(yàn)器材。

　　2. 加樣：在酶標(biāo)板上設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白對(duì)照孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，樣本孔加入待測(cè)樣本，空白對(duì)照孔加入等量的樣本稀釋液。

　　3. 溫育：將酶標(biāo)板用封板膜封好，置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘。

　　4. 洗滌：小心揭去封板膜，棄去液體，甩干，每孔加洗滌液，靜置30后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

　　5. 加酶：每孔加入酶結(jié)合物工作液，空白對(duì)照孔不加。

　　6. 再溫育：同步驟3。

　　7. 再洗滌：同步驟4。

　　8. 顯色：每孔先加入顯色劑A，再加入顯色劑B，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。

　　9. 終止：每孔加終止液，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

　　10. 測(cè)定：以空白對(duì)照孔調(diào)零，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定各孔光密度(OD值)。

　　五、結(jié)果計(jì)算與判讀

　　1. 結(jié)果計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣本OD值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對(duì)應(yīng)的TNF-α濃度。

　　2. 結(jié)果判讀：若樣本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上的濃度點(diǎn)，則應(yīng)將樣本稀釋后再重新測(cè)定。結(jié)果以樣本中TNF-α的實(shí)際濃度表示，單位為pg/ml或ng/ml。

　　六、注意事項(xiàng)

　　1. 本試劑盒應(yīng)在2-8℃保存，避免陽(yáng)光直射和冷凍。

　　2. 試劑盒中的試劑應(yīng)盡量避免交叉污染，不同批次的試劑不可混用。

　　3. 加樣時(shí)應(yīng)使用一次性加樣器，避免重復(fù)使用造成誤差。

　　本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

使用說(shuō)明

　　一、產(chǎn)品概述

　　人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒是一種用于定量檢測(cè)人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中TNF-α含量的體外診斷試劑。本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理，通過(guò)特異性抗體與TNF-α結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，再利用酶催化底物顯色的方法，實(shí)現(xiàn)對(duì)TNF-α的定量檢測(cè)。

　　二、試劑盒組成

　　本試劑盒包含以下組件：

　　1. 酶標(biāo)板：包被有特異性TNF-α抗體的96孔板。

　　2. 標(biāo)準(zhǔn)品：已知濃度的TNF-α標(biāo)準(zhǔn)溶液，用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　3. 抗體工作液：含有TNF-α特異性抗體的溶液，用于與樣本中的TNF-α結(jié)合。

　　4. 酶結(jié)合物：含有辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的TNF-α抗體的溶液，用于形成免疫復(fù)合物。

　　5. 底物液：含有四甲基聯(lián)苯胺(TMB)的溶液，用于顯色反應(yīng)。

　　6. 終止液：用于終止顯色反應(yīng)的溶液。

　　7. 洗滌液：用于洗滌酶標(biāo)板，去除未結(jié)合的雜質(zhì)。

　　三、實(shí)驗(yàn)原理

　　ELISA法檢測(cè)TNF-α的基本原理是：將TNF-α特異性抗體包被在酶標(biāo)板上，形成固相抗體;加入樣本后，樣本中的TNF-α與固相抗體結(jié)合，形成免疫復(fù)合物;再加入酶結(jié)合物，與免疫復(fù)合物中的TNF-α特異性抗體結(jié)合，形成酶標(biāo)記的免疫復(fù)合物;加入底物液，酶催化底物顯色，顏色深淺與TNF-α含量成正比。通過(guò)測(cè)定顏色深淺，可以計(jì)算出樣本中TNF-α的含量。

　　四、實(shí)驗(yàn)步驟

　　1. 準(zhǔn)備工作：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘;按照實(shí)驗(yàn)需要，準(zhǔn)備好所需的試劑、樣本和實(shí)驗(yàn)器材。

　　2. 加樣：在酶標(biāo)板上設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白對(duì)照孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，樣本孔加入待測(cè)樣本，空白對(duì)照孔加入等量的樣本稀釋液。

　　3. 溫育：將酶標(biāo)板用封板膜封好，置于37℃恒溫箱中溫育30分鐘。

　　4. 洗滌：小心揭去封板膜，棄去液體，甩干，每孔加洗滌液，靜置30后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

　　5. 加酶：每孔加入酶結(jié)合物工作液，空白對(duì)照孔不加。

　　6. 再溫育：同步驟3。

　　7. 再洗滌：同步驟4。

　　8. 顯色：每孔先加入顯色劑A，再加入顯色劑B，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。

　　9. 終止：每孔加終止液，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

　　10. 測(cè)定：以空白對(duì)照孔調(diào)零，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定各孔光密度(OD值)。

　　五、結(jié)果計(jì)算與判讀

　　1. 結(jié)果計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣本OD值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找對(duì)應(yīng)的TNF-α濃度。

　　2. 結(jié)果判讀：若樣本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上的濃度點(diǎn)，則應(yīng)將樣本稀釋后再重新測(cè)定。結(jié)果以樣本中TNF-α的實(shí)際濃度表示，單位為pg/ml或ng/ml。

　　六、注意事項(xiàng)

　　1. 本試劑盒應(yīng)在2-8℃保存，避免陽(yáng)光直射和冷凍。

　　2. 試劑盒中的試劑應(yīng)盡量避免交叉污染，不同批次的試劑不可混用。

　　3. 加樣時(shí)應(yīng)使用一次性加樣器，避免重復(fù)使用造成誤差。

　　本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。

原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司