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　　如何排除ELISA試劑盒“邊緣效應”
 

　　我們在使用ELISA試劑盒的實驗測定的時候，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應”，也就是外周孔顯色較中心孔深。經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體，在實驗室的常規(guī)ELISA測定中，將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時，將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃)，就可以很容易地排除“邊緣效應”，并且可提高測定的重復性。

　　1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。

　　2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

　　3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

　　4. 試劑應按標簽說明書儲存，使用恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

　　5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

　　6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質使用。

　　7. 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

　　8. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用充分混勻試劑盒里。

　　9. 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

　　10. 底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

　　11. 加入試劑的順序應一致，所有反應板孔溫育的時間一樣。

　　12. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

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原創(chuàng)作者：本生（天津）健康科技有限公司