技術文獻
正確處理人血清鐵蛋白(SF)ELISA試劑盒樣本及操作方法
BUNSEN本生人血清鐵蛋白(SF)ELISA試劑盒實驗樣本的處理方法在收集樣本都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆。標本應避免反復凍融?/p>
液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成、應再次離心。
2.血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑、混合10-20分鐘后、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3.尿液:用無菌管收集、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成、應再次離心、胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時、用無菌管收集、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清。
5.培養(yǎng)細胞:檢測細胞內(nèi)的成份時、用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液、細胞濃度達到100萬/ml左右、通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑、以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6.組織標本:切割標本后、稱取重量、加入一定量的PBS、PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆、標本融化后仍然保?-8℃的溫度、加入一定量的PBS(PH7.4)、或組織蛋白萃取試劑、用手工或勻漿器將標本勻漿化、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、分裝后一份待檢測、其余冷凍備用。
產(chǎn)品介紹:
實驗目的/有效期
樣本處理及要求
操作步驟
實驗結果計算
實驗原理
需要而未提供的試劑和器材
注意事項
ELISA試劑盒性能
ELISA試劑盒組成
試劑準備
洗板方法
人血清鐵蛋白試劑盒操作:
人血清鐵蛋白試劑盒使用,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結果。
人血清鐵蛋白試劑盒性能:
1、靈敏度:小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為1.0 ng/mL。
2、特異性:不與其它細胞因子反應。
3、重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
文章關鍵詞:人試劑盒 血清鐵蛋白 SF試劑盒 ELISA試劑盒 試劑盒 BUNSEN本生
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原創(chuàng)作者:本生(天津)健康科技有限公司
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