人法尼醇X受體(FXR)ELISA試劑盒實驗原理及注意事項_技術(shù)文章

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人法尼醇X受體(FXR)ELISA試劑盒實驗原理及注意事項
閱讀次數(shù)：15789 發(fā)布時間：2021/1/26 11:25:19

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　　人法尼醇X受體(FXR)elisa試劑盒實驗原理及注意事項

　　人法尼醇X受體(FXR)elisa試劑盒實驗原理：

　　本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人法尼醇 X 受體(FXR)水平。用純化的人法尼醇X 受體(FXR)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入法尼醇 X 受體(FXR)，再與 HRP 標(biāo)記的法尼醇 X 受體(FXR)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物 TMB 顯色。 TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的法尼醇 X受體(FXR)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度( OD 值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人法尼醇 X 受體(FXR)濃度。

　　人法尼醇X受體(FXR)ELISA試劑盒注意事項：

　　1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

　　2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

　　3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

　　4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的 OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋定倍數(shù)( n 倍)后再測定，計算時請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

　　5.封板膜只限次性使用，以避免交叉污染。

　　6.底物請避光保存。

　　7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

　　8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

　　9.本試劑不同批號組分不得混用。

　　人法尼醇X受體(FXR)ELISA試劑盒計算：

　　以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)， OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的

　　OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計算出標(biāo)

　　準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的 OD 值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，

　　即為樣品的實際濃度。

　　保存條件及有效期

　　1.試劑盒保存：; 2-8℃。